HR8221-20T 高纯度外泌体提取试剂盒(乳汁/唾液)
本试剂盒按每个样本处理1.5mL乳汁/唾液计,每个50T试剂盒大约可以用于提取75mL乳汁/唾液。如果需要处理大量的乳汁/唾液,将提取液按说明书标准操作的体积等比例调整即可。...
产品特点:
● 使用方便,无需超速离心,省时省力;
● 纯度高,富集量大,应用范围广;
● 获取的Exosome结构和功能完整;
● 稳定性好,便于运输,便于保存。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 离心机 ● 移液器 ● PBS或HBSS(无酚红) ● 纯水
使用注意事项:
● 以下以2mL乳汁/唾液为例,实际操作时按乳汁/唾液样本和提取液用量体积比等比例调整使用即可。
● 不同乳汁/唾液样本外泌体数量差异极大,请根据实际情况选择乳汁/唾液样本的量,根据下游应用和参考文献确定。条件允许情况下采用尽可能多的乳汁/唾液样本。
● 常规的乳汁/唾液样本最佳培养上清上样量为5-10mL及以上,条件允许的情况下采用尽可能多的乳汁/唾液样本。
1. 收集2mL待提取的乳汁/唾液样品,置2-8℃保存。
【注】:
● 冻存样品解冻后置2-8℃保存。
2. 将样品在4℃条件下,3000×g离心15分钟。弃沉淀,收集上清。
3. 小心将上清移入另一干净离心管中。
4. 将样品在4℃条件下,10000×g离心20分钟。弃沉淀,收集上清。
5. 小心将上清移入另一干净离心管中。
6. 在2 mL乳汁/唾液样品中加入2 mL提取液A,盖紧离心管盖,上下颠倒混匀1分钟左右,使液体充分混匀。
7. 在4 mL液体样品中加入1 mL提取液B,盖紧离心管盖,上下颠倒混匀1分钟左右,使液体充分混匀。
【注】:
● 试剂B使用前请充分混匀。
8. 置2-8℃冰箱静置过夜。
【注】:
● 静置保存时间不少于10小时。
9. 在4℃条件下,10000×g离心60分钟。
10. 小心移除上清,收集沉淀。
【注】:
● 尽可能吸干上清。
● 吸取时小心,防止吸掉沉淀。
11. 取500μL外泌体保存液将沉淀重悬,用移液器轻轻吹打混匀,得到外泌体沉淀重悬液,进行下列外泌体纯化步骤操作。
清洗外泌体纯化离心管:
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。
【注】:
● 可以在外泌体提取步骤中需要使用前再清洗。
● 重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹。
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