ELISA试剂盒检测样品中sIL-2R含量全过程

  ELISA试剂盒检测样品中sIL-2R含量需预备的资料和试剂

  (1)纯化或重组的IL-2R蛋白(α链，P55，CD25，Tac抗原)(40.000u/ml)

  (2)FITC符号的抗IL-2R McAb(0.2μg/ml)：FITC为异硫氰酸荧光素，这儿仅作为半抗原运用，而不作为荧光素符号。

  (3)碱性磷酸酶符号的兔抗FITC抗体(酶标抗体)

  (4)对硝基苯磷酶盐底物液;用pH9.8的二乙醇胺缓冲液溶解，配成浓度为1mg/ml。

  (5)1%牛血清白蛋白-PBS(1%BSA-PBS)：为封闭液点稀释液

  (6)不同倍比稀释度的sIL-2R规范品：以1% BSA-PBS稀释。

  (7)洗刷液(0.05%Tween20-PBS)

  (8)待测sIL-2R样品

  (9)96孔酶标板(聚苯乙烯板)，酶标仪，波长465nm滤光片

  (10)刻度吸管，毛细吸管，加样器(头)，4℃冰箱

  ELISA试剂盒检测样品中sIL-2R含量具体操作步骤

  (1)以必定浓度的纯化或重组的IL-2R(P55)蛋白包被96孔酶标板，100ul/孔，4℃过夜(16-72h);

  (2)弃包被液，用1%BSA-PBS封闭非特异性结合位点，200ul/孔，置室温2h;

  (3)用洗刷液加满各孔置3min，然后倾去，反复洗刷3次;

  (4)别离参加不同稀释度的sIL-2R规范品及待测样品，50μl/孔;

  (5)各孔均参加FITC符号的IL-2R McAb，50μl/孔，充沛混匀后置室温2h;

  (6)同上洗刷3次;

  (7)各孔均参加碱性磷酶酶符号的兔抗FITC抗体，100μl/孔，置室温1h;

  (8)同上洗刷3次;

  (9)各孔均参加底物液，100μl/孔，置室温15-30min;

  (10)用酶标仪以波长405nm测各孔OD值。

  ELISA试剂盒检测样品中sIL-2R含量结果剖析办法

  (1)以sIL-2R规范品各稀释度对应的浓度值为横座标(X)，相应的OD值为纵座标(Y)，在一般座标纸上制作竞赛按捺规范曲线，OD值随规范品sIL-2R浓度升高而下降。

  (2)依据待测样品所测得的OD值，在规范曲线上查得样品sIL-2R含量。

  (3)ELISA试剂盒检测样品中sIL-2R含量运用本办法时，不需要核算按捺百分率。

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