本仪器一般都较为昂贵，使用不当又易导致损坏，且再生尤其困难，所以使用、维护与保养均需特别慎重。本文主要介绍手性柱使用时需要特别注意的一些问题。

1、将色谱柱接到色谱仪器之前，必须先用合适的溶剂冲洗流路（包括六通阀和定量环）。杜流路中残存丙酮、氯仿、DMF（二甲基甲酰胺）、DMSO（二甲基亚砜）、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF（四氢呋喃）等，以防止破坏手性固定相。如果在进样检测，进样间隔的洗针液必须更换成合适的溶剂，是15%～20%的异丙醇溶液。然后连接好色谱柱，不接检测器，用纯水以0.5ml/min流速冲洗约20min。（注意：流速需小间隔从0升至0.5ml/min）

2、手性柱保存时，必需保证柱内无缓冲盐或其他盐类物质残存。

3、样品检测前需仔细询问送样人员样品中可能含有的溶剂，如果工艺中用到丙酮、氯仿、DMF、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF，则需尽量烘干。样品尽量溶解在流动相中，并用0.45μm滤膜过滤。不能使用强碱性物质作为流动相添加剂或者溶解样品，因为这样会损坏填料中的硅胶成分。 

4、连接检测器，再用纯水以0.5ml/min流速冲洗约120min。

5、提倡在室温下使用，但一般要求柱温不超过25℃。

6、用15%以内的异丙醇溶液以0.5ml/min流速冲洗约60min。

7、要特别注意流动相及样品溶解溶液的pH值，佳pH范围为4.0～7.0，切不可超过10.0，以防止硅胶溶解而损坏填料，所以pH不要超过8.0。否则，易导致手性分离不佳、色谱峰严重变宽、色谱峰拖尾及分叉等。强碱性溶液的导入，尤其容易导致手性柱不可逆损坏，无再生可能而彻底报废！

8、再用纯水以0.5ml/min流速冲洗约60min。

9、用流动相以不超过0.8ml/min流速平衡约1h直至基线平稳，进样检测。

10、如果系统中或者色谱柱中含较高浓度的异丙醇或者乙醇时，由于他们的粘度比较大，平衡色谱柱时需特别注意压力变化，可采用低流速平衡，当柱压下降后再逐渐升高至要求的流速。  （3）样品检测完毕，用无水乙醇清洗色谱柱，以0.5ml/min冲洗3个小时。用无水乙醇柱压会比较高，所以流速不能过高，冲洗过程中注意压力变化，如超过50bar，则把流速降至0.3ml/min，并适当延长冲洗时间

注：手性柱在使用过多次且正常后，可将时间适当缩短